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產(chǎn)品展示 / PRODUCTS
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人白介素8 ELISA試劑盒
名稱 人白介素8 ELISA試劑盒
型號
更新時間 2023-09-25
特點(diǎn) IL-8試劑盒采用雙抗體夾心酶聯(lián)免疫吸附檢測技術(shù)。特異性抗人IL-8單克隆抗體預(yù)包被在高親和力的酶標(biāo)板上。酶標(biāo)板孔中加入標(biāo)準(zhǔn)品和檢測樣本,經(jīng)過孵育,樣本中存在的IL-8與固相抗體結(jié)合。洗滌去除未結(jié)合的物質(zhì)后,加入生物素化的單克隆抗體,孵育。}
  • 詳細(xì)內(nèi)容

一.Human IL-8 ELISA試劑盒檢測原理:

本試劑盒采用雙抗體夾心酶聯(lián)免疫吸附檢測技術(shù)。特異性抗人IL-8單克隆抗體預(yù)包被在高親和力的酶標(biāo)板上。酶標(biāo)板孔中加入標(biāo)準(zhǔn)品和檢測樣本,經(jīng)過孵育,樣本中存在的IL-8與固相抗體結(jié)合。洗滌去除未結(jié)合的物質(zhì)后,加入生物素化的單克隆抗體,孵育。洗滌去除未結(jié)合的生物素抗體,加入辣根過氧化物酶標(biāo)記的鏈霉親和素(S-HRP)。洗滌,加入顯色底物TMB,避光顯色。終止液終止反應(yīng),在450 nm波長(參考波長570-630 nm)測定吸光度值。顏色反應(yīng)的深淺與樣本中IL-1α的濃度成正比。

 

二.Human IL-8 ELISA試劑盒樣本采集與貯存
細(xì)胞培養(yǎng)上清 沉淀之后即刻檢測, 或者分裝,-20℃貯存。避免反復(fù)凍融。

血清樣本 分離管分離血清。在1000 g離心之前,使血樣凝集30分鐘。吸取血清樣本之后即刻檢測,或者分裝,-20℃貯存。避免反復(fù)凍融。

血漿樣本 EDTA,枸櫞酸鈉或肝素抗凝收集血漿樣本。在血樣收集 30分鐘內(nèi)離心收集樣本。即刻檢測,或者分裝,-20℃貯存。避免反復(fù)凍融。 本試劑盒可能適用于其它生物學(xué)樣本。

注意:檢測前,樣本中可見的沉淀必須去除。不要使用嚴(yán)重溶血或高血脂的樣本。 樣本應(yīng)該被分裝并貯存于-20℃,以避免人IL-6活性的丟失。如果在24小時內(nèi)檢測,樣本可以存放在2-8℃。 避免樣本的反復(fù)凍融。在分析前,冷凍樣本應(yīng)該緩慢的恢復(fù)至室溫,輕柔地混勻。

三.Human IL-8 ELISA試劑盒檢測步驟:

1. 準(zhǔn)備好所有需要的試劑及工作濃度標(biāo)準(zhǔn)品。 2. 將不需要的板條拆卸下來,放回裝有干燥劑的鋁箔袋,重新封好封口。 3. 300 μl洗液洗板兩次,加入300 μl洗液靜置浸泡15分鐘。為了獲得理想的實(shí)驗(yàn)結(jié)果浸泡是必須的。棄掉洗液之后,在吸水紙上將微孔板拍干。洗板完成之后,請立即使用微孔板,不要讓微孔板干燥。 4. 每孔加入50 μl檢測緩沖液。 5. 加入50 μl的標(biāo)準(zhǔn)品,樣本和對照品。保證連續(xù)加樣,請不要間斷。加樣過程在15分鐘內(nèi)完成。 6. 每孔加入50 μl檢測抗體。 7. 使用封板膜封板。100轉(zhuǎn)/分鐘振蕩,室溫孵育2小時。8. 棄掉液體,每孔加入300 μl洗液洗板,洗滌6次。每次洗板,在吸水紙上拍干。為獲得理想的實(shí)驗(yàn)性能,必須*移除殘留液體。 9. 每孔加入100 μl辣根過氧化物酶標(biāo)記的鏈霉親和素。 10. 使用新的封板膜封板。100轉(zhuǎn)/分鐘振蕩,室溫孵育45分鐘。 11. 重復(fù)步驟8。 12. 每孔加入100 μl顯色底物TMB,避光,室溫孵育10-30分鐘。 13. 每孔加入100 μl終止液。顏色由藍(lán)色變?yōu)辄S色。如果顏色呈現(xiàn)綠色或者顏色的變化明顯不均勻,請輕輕叩擊板框,充分混勻。 14. 在30分鐘之內(nèi),酶標(biāo)儀450 nm波長測定OD值。如果能夠進(jìn)行雙波長檢測,參考波長設(shè)定為570 nm或者630 nm。如果不能雙波長檢測,請用450 nm的測定值減去570 nm或630 nm的測定值。僅使用450 nm測定會導(dǎo)致OD值偏高,并且準(zhǔn)確度降低。

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