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細(xì)胞因子試劑盒在科研方面的應(yīng)用
2022-02-20 瀏覽次數(shù)：1363
細(xì)胞因子試劑盒從靈敏度、特異性、精密度、穩(wěn)定性、簡便性、安全性及經(jīng)濟(jì)性全面評價。靈敏度有二層含義，為試劑檢出被檢物質(zhì)的低量的能力；為試劑對大量樣品中陽性檢出的能力。特異性常用交叉反應(yīng)率表示。含有與待測物相近結(jié)構(gòu)部份的物質(zhì)可能存在交叉反應(yīng)，使測定結(jié)果升高，可能導(dǎo)致假陽性，所以交叉反應(yīng)是評價其質(zhì)量的關(guān)鍵指標(biāo)。精密度一般指其批內(nèi)CV%，其值應(yīng)小于15%；定量試劑應(yīng)同時考察線性范圍。準(zhǔn)確度：通過添加回收實(shí)驗(yàn)進(jìn)行評價。
細(xì)胞因子試劑盒主要用于科研方面，不用于臨床診斷，可以用于檢測各種指標(biāo)。做快速檢測時，待檢測的樣品數(shù)越多，出現(xiàn)加錯的概率也就越大，特別容易出錯的是在酶聯(lián)偶合物（conjugate）與樣品液或標(biāo)液混合的階段，因?yàn)檫@時使用的是單道槍。其實(shí)解決的方法比較簡單，我們只要把操作上的順序加以調(diào)換，即先把待測液或標(biāo)液加入稀釋孔中，再加入酶聯(lián)偶合物就不會出現(xiàn)錯誤了。而且這兩個順序交還對結(jié)果也沒有影響，因?yàn)檫@一步的主要目的是讓兩種液體充分混合。
細(xì)胞因子試劑盒采用雙抗體夾心ELISA法，用抗肝細(xì)胞生長因子(HGF)抗體包被于酶標(biāo)板上，實(shí)驗(yàn)時樣品或標(biāo)準(zhǔn)品中的人肝細(xì)胞生長因子(HGF)與包被抗體結(jié)合，游離的成分被洗去。依次加入生物素化的抗肝細(xì)胞生長因子(HGF)抗體和辣根過氧化物酶標(biāo)記的親和素?？垢渭?xì)胞生長因子(HGF)抗體與結(jié)合在包被抗體上的人肝細(xì)胞生長因子(HGF)結(jié)合、生物素與親和素特異性結(jié)合而形成免疫復(fù)合物，游離的成分被洗去。加入顯色底物(TMB)，TMB在辣根過氧化物酶的催化下呈現(xiàn)藍(lán)色，加終止液后變成黃色。用酶標(biāo)儀在450nm波長處測OD值，肝細(xì)胞生長因子(HGF)濃度與OD450值之間呈正比，通過繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線計算出樣品中細(xì)胞生長因子(HGF)的濃度。
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